什么是HBV-DNA定量检测?

[来源:广州肝病医院] [作者:徐主任] [日期:2009-10-28] [热度:]
HBV-DNA定量是一个随时改变的不正常数值,影响其改变的缘故很多,医治时数值可能发生变化,不治疗时数值也会发生变化。也就是说,数值改变可能是治疗效应,也若是自然变化或检验偏差。现阶段用于检测HBV DNA定量的办法不统一

广义的HBV DNA包括血清内及肝脏细胞内的DNA、肝脏细胞核内的共价闭合环状DNA(即cccDNA),但医学临床所说的HBV-DNA指的是血清内的HBV-DNA,说明有多少个病毒颗粒在血液内。定量检测现多用荧光定量PCR,在严格实验条件下,用特异引物与被检样本中的HBV DNA结合,在体外对HBV DNA进行扩增;同时荧光探针也与样本中的HBV DNA结合,每扩增一次就放出一个荧光信号,通过信号接受器、电脑程序处理后便可得出样本中HBV DNA的含量(拷贝数)。需要明白,如测得HBV DNA定量为“410的4次方copy/ml”,不能简单地理解为“每毫升血液中有乙肝病毒4万个”。Copy是拷贝的意思,如上所说,它是利用DNA信号扩增技术,由计算机算出的血液中乙型肝炎病毒核酸的含量。拷贝数是一个分子生物定量单位,并非是通常的数量单位。当然拷贝数越高,说明病毒核酸含量越多,体内病毒载量越高,病毒复制越活跃,传染性也越强。HBV DNA定量也能间接反映机体的免疫应答水平,体内病毒含量高低,与机体针对乙肝病毒的免疫反应强弱有关。但病毒颗粒多少与被感染者肝脏伤害程度并不直接相对应,它不是反映肝炎病情轻重的指标。

由于HBV基因定量技术的发展和成熟,目前已有可能从某些现象上阐明HBV复制与致病性之间的“量效”关系。血清HBV DNA的临床意义是:(1)抗病毒治疗前HBV DNA水平(基线HBV DNA)是决定是否治疗的重要指标。HBeAg(乙肝病毒e抗原)阳性慢性乙肝HBV DNA>10的5次方;HBeAg阴性慢性乙肝HBV DNA>10的4次方;丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高超过正常最高值2倍以上,适合抗病毒治疗。(2)抗病毒治疗前HBV DNA水平高低(病毒高载量还是低载量),与抗病毒疗效有关。治疗前HBV DNA水平很高(>10的10次方),ALT上升不显著,疗效较差。治疗前HBV-DNA水平<10的9次方,ALT水平大于2倍、小于10倍正常上限值,应用干扰素有较大可能获得HBeAg消失,同时有或没有抗-HBe转阳,达到持久病毒学应答。(3)治疗前HBV DNA水平是区别HBeAg阴性乙肝与非复制期乙肝的惟一指标。HBeAg阴性慢性乙肝HBSAg阳性,HBeAg阴性,抗-HBe阳性,HBV DNA阳性(大于10的3或4次方),后者HBV DNA阴性(小于10的3次方)。另外,虽然基因定量分析是一项临床应用型技术,但对基础研究也有一定的应用价值,尤其是在当前基因治疗、转基因动物、核酸疫苗等热点研究领域,基因定量分析可能是一种很好的辅助手段,对发现一些有意义的现象有一定帮助。

HBV-DNA定量是一个随时改变的不正常数值,影响其改变的缘故很多,医治时数值可能发生变化,不治疗时数值也会发生变化。也就是说,数值改变可能是治疗效应,也若是自然变化或检验偏差。现阶段用于检测HBV DNA定量的办法不统一,除荧光定量PCR技术外,还有竞争PCR技术、PCR酶联免疫吸附法、荧光标记物法和PCR酶联化学发光法等。该检测技术敏感性极高,实际操作中极微量的核酸污染即可出现假阳性结果。其正常值和异常值范围难以统一,各地、各单位检验数据没有可比性。

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